Е. COLI-СИСТЕМИ: ПЛАЗМІДНІ ВЕКТОРИ

Існує багато різних принципів класифікації плазмід. На особливу увагу заслуговує принцип, заснований на обліку наявності в них модульних сегментів ДНК. У табл. 5.7 підсумовані дані про модульних особливості п'яти природних плазмід. Кожен модульний сегмент може містити один або кілька генів, або цис-діючих елементів, таких, наприклад, як область ініціації реплікації.

Таблиця 5.7

Молекулярна організація плазмід

Кожна плазмида повинна мати один або кілька модулів реплікації, які дозволяють їй автономно реплицироваться. В одному з класів плазмід, представниками якого є F-плазм іди, реплікація і сегрегація регулюються узгоджено з реплікацією бактеріального генома, і в кожній клітині міститься одна або дві копії плазміди. Такий тип реплікації називають репликацией зі строгим контролем. Другий тип модуля реплікації вільний від такого контролю, що призводить до існування в клітці багатьох копій плазмід. Він отримав назву модуля реплікації з ослабленим контролем.

Модулі ще одного типу містять гени, білкові продукти яких інактивують антибіотики. Плазміди, що несуть такі модулі, часто називають R-плазміди.

Деякі плазміди містять також багато інших модулі, що кодують, наприклад, системи рестрикції-модифікації (система Eco RT).

Модулі як рухомі елементи. Плазміди, виділені незалежно і навіть в організмах, які живуть в різних місцях планети, часто містять близькоспоріднені модулі. На підставі цих та інших даних виникло уявлення про те, що між г Еном відбувається обмін деякими генетичними модулями у вигляді інтактних сегментів ДНК. В даний час доведено, що в бактеріальних плазмидах відбувається безліч перебудов і обмінів. Наприклад, ^ -плазміди, присутні в клітинах певних бактерій, відмінних від Е. coli, особливо в Salmonella typhimurium або Proteus mirabilis, можуть диссоциировать на дві окремі плазміди, кожна з яких містить одну з двох її частин. F-подібні послідовності утворюють незалежно реплицирующихся кон'югатівних плазмиду, що позначається RTF, а інша частина - іншу реплицирующихся, але некон'югатівную плазмиду, що позначається р Оскільки як RTF, так і г - незалежні реплікони, кожна з них повинна містити модуль ДНК, що забезпечує реплікацію. Подібні перебудови не є лабораторним курйозом: RTF- і г-плазміди виявлені і в природі.

Ці та інші дані, отримані при вивченні генетики бактерій, привели до ідентифікації дискретних рухомих елементів, названих Інсерційні послідовності і транспозонами, які здатні переміщатися не тільки між плазмідами, але і між плазмідними і клітинними геномами. Багато модулі в плазмидах зазвичай є рухомими елементами або фланковані ними.

Плазміди як вектори. Багато плазміди використовують в якості векторів для молекулярного клонування в Е. coli. Плазміди, виявлені в природі, згодом були модифіковані, вкорочені, реконструйовані і піддані рекомбінації. В результаті були отримані універсальні плазміди, призначені для вирішення конкретних експериментальних задач. Кращі з них містять генетичні маркери, що дозволяють спростити відбір рекомбінантних молекул. З усіх векторів при роботі з Е. coli найчастіше використовують плазмиду pBR322. Цей вектор був сконструйований за допомогою класичних генетичних методів (In vivo) в поєднанні з методами, застосовуваними при роботі з рекомбінантними ДНК, і володіє багатьма властивостями ідеального плазмідної Beicropa для клонування.

1. Епіталамус і субталамус - нервова система: анатомія, фізіологія, Нейрофармакологія
   епіталамус займає медио-дорсо-каудалиюе положення по відношенню до інших структур проміжного мозку, т. е. розташований посередині його верхньої задньої частини (див. рис. 7.1). Епіталамус має небольтой обсяг і, крім нервових утворень, включає залозу внутрішньої секреції - епіфіз. Нервові освіти
2. Епистаз - генетика в 2 Ч. Частина 1
   Переважання одного домінантного гена над іншим домінантним неалельні геном називається епістаз. Наприклад, у вівса при схрещуванні сорту чернозерного з серозерньгм в F всі рослини виходять чернозерние. В F 2 спостерігається типове для епістазу співвідношення: 12/16 рослин з чорними зернами,
3. Епіфіз (шишковидна заліза) - нейрофізіологія
   Епіфіз розташований над четверохолмием середнього мозку. Він з'єднаний з мозком ніжкою. У людини епіфіз досягає максимальних розмірів до 4-7 років, а потім зазнає зворотний розвиток (інволюцію). У епіфіза виявлено два основних фізіологічно активних продукту: мелатонін і серотонін. Їх синтез
4. Енергетика окислення жирних кислот - біохімія частина 2.
   Окислення жирних кислот супроводжується виділенням великої кількості метаболічної енергії. При розрахунку балансу АТФ в цьому процесі слід припустити, що все утворилися молекули ацетил-КоА включаються в цикл трикарбонових кислот і їх повне окислення супроводжується синтезом 12 молекул АТФ
5. Ендокринна система - анатомія центральної нервової системи
   Ендокринна система складається з залоз внутрішньої секреції (рис. 1.10). Мал. 1.10. Розташування ендокринних залоз в тілі людини Залозами називаються органи тварин і людини, що виробляють і виділяють специфічні речовини (секрети), необхідні для реалізації деяких функцій організму. Процес вироблення
6. Ембріональний розвиток, дроблення - біологія. Частина 1
   Дроблення - це ряд послідовних мітотичних поділів зиготи і далі бластомерів, що закінчуються утворенням багатоклітинного зародка - бластули. Перше розподіл дроблення починається після об'єднання спадкового матеріалу пронуклеусов і утворення спільної метафазної пластинки. Виникаючі при дробленні
7. Електротерапія постійним струмом, алгоритм дії медсестри при проведенні гальванізації або електрофорезу - сестринський догляд в фізіотерапевтичної практиці
   електротерапія - використання в лікуванні електричних струмів, електромагнітних і електричних полів, в імпульсному або безперервному режимі. Гальванізація і електрофорез - лікування безперервним електрострумом малої сили (до 50 мА) і низької напруги. В результаті впливу в тканинах виникають
8. Еферентні зв'язку мозочка - нейрофізіологія
   Все еферентні виходи з мозочка утворені тільки відростками клітин Пуркіньє. Еферентні волокна мозочка направляються до тих же структурам, від яких він отримує аферентні сигнали: спинний мозок, вестибулярні ядра, ретикулярна формація, червоне ядро, а також показано, що у мозочка є еферентні