Головна
Cоціологія || Гуманітарні науки || Мистецтво та мистецтвознавство || Історія || Медицина || Науки про Землю || Політологія || Право || Психологія || Навчальний процес || Філософія || Езотерика || Екологія || Економіка || Мови та мовознавство
ГоловнаМедицина → біохімія
««   ЗМІСТ   »»

ХІМІЧНИЙ СИНТЕЗ І АНАЛІЗ БІЛКІВ

Синтез. Здійснення білкового синтезу хімічним шляхом привертало увагу багатьох дослідників. Метод твердофазного синтезу, розроблений Б. Мсрріфілдом, дав можливість отримувати чималі поліпептиди. Таким же способом було отримано гормон інсулін, а його вже можна віднести до класу білків. У разі інсуліну більш важким завданням було з'єднання двох поліпептидних ланцюгів в активну макромолекулу. К. Діксон і А. Уардлоу впоралися з цим завданням і поклали основу хімічного синтезу білків. Однак незважаючи на розробку автоматичних синтезаторів, метод хімічного синтезу білків не отримав широкого поширення через наявність великої кількості технічних обмежень. У природі невеликі поліпептиди синтезуються за допомогою відповідних ферментів, основна ж маса білків утворюється за допомогою матричного синтезу.

Аналіз. Методи аналізу білкових макромолекул селективні і здійснюються в залежності від того, яка структура є об'єктом дослідження, і починаються з визначення амінокислотного складу. Для цього необхідно провести повний гідроліз пептидних зв'язків і отримати суміш, що складається з окремих амінокислот. Гідроліз проводять за допомогою 6 М соляної кислоти при кип'ятінні протягом 24 год. Так як для гідролізу пептидних зв'язків ізолейцин і валін цього може бути недостатньо, проводять контрольний 48- і 72-годинний гідроліз. Деякі амінокислоти, наприклад триптофан, при кислотному гідролізі руйнуються, тому для їх ідентифікації використовують гідроліз за допомогою метансульфонової кислоти в присутності триптаміну. Для визначення цистеїну білок окислюють надмуравьиной кислотою, при цьому цистеїн перетворюється в цистеїнових кислоту, яку потім аналізують. Виділення та ідентифікацію амінокислот проводять за допомогою амінокислотних аналізаторів, принцип дії яких заснований на хроматографичному поділі білкового гідролізату на сульфополістірольних катионитом. В основі кількісного визначення тієї чи іншої амінокислоти лежить кольорова реакція з нингидрином, однак більш перспективним слід вважати метод, при якому амінокислоти модифікують в похідні, які поглинають світло у видимому діапазоні. Поділ суміші амінокислот проводять за допомогою високоефективної рідинної хроматографії, а саме визначення - спектрофотометрично. Наступним етапом є визначення кінцевих амінних і карбоксильних угруповань в білкової макромолекулі. Це необхідно для того, щоб знати, який білок піддається аналізу - протомеров або олигомер. Олігомерні білки попередньо обробляють надмуравьиной кислотою для поділу на окремі поліпептидні ланцюги. А-Концсвую амінокислоту визначають за допомогою дінітрофторбензола, який реагує з а-амі- ногруппой білка, утворюючи забарвлене в жовтий колір похідне. Що стосується С-кінцевих амінокислот, то їх визначення пов'язане із застосуванням ферментативного методу. Як ферменту найчастіше використовують карбокси- пептідази А, яка послідовно відщеплює від карбоксильного кінця окремі амінокислоти. Суть методу полягає в кількісному визначенні накопичення вільних амінокислот в часі.

  1. Інстинкти - критерії інстинкту і схема протікання - фізіологія вищої нервової діяльності та сенсорних систем
    Існує кілька визначень інстинкту. Інстинкт - це комплекс фіксованих дій, властивих організму даного виду, реалізація яких залежить від функціонального стану організму і від ситуації, в даний момент ситуації. Інстинкт - це жорстко фіксована послідовність дій, або рухових актів, що визначається
  2. Інші та неуточнені хвороби пульпи зуба, ретроградний пульпіт - стоматологія. Ендодонтія
    Даний розділ містить ретроградний, травматичний і залишковий пульпіти. Це запалення пульпи в интактном зубі, без каріозної порожнини. Як правило, це хронічний пульпіт, періодично дає загострення з клінікою гострого пульпіту. Тонична діагностика, визначення причинного зуба ретроградного пульпіту
  3. Ініціація трансляції - біохімія частина 2.
    Трансляція здійснюється на рибосомах - своєрідних молекулярних машинах, що функціонують в цитоплазмі і орієнтованих на біосинтез всіх видів білкових макромолекул. Рибосоми утримують у функціональному стані багатокомпонентну білок-сінтезіруюшую систему, а також Мал. 29.2. Повна рибосома і компоненти
  4. Імунні властивості крові, види імунітету - вікова фізіологія і психофізіологія
    Чужорідні для організму макромолекули називають антигенами. Вони викликають в організмі утворення антитіл, які специфічно реагують на ці антигени. Розрізняють природні і імунні антитіла, які є в сироватці крові людини. природні антитіла являють собою спадковий ознака крові людини. У плазмі
  5. Хвороби оперованого шлунка - сестринський догляд в фізіотерапевтичної практиці
    Оскільки фізіотерапія сприяє реабілітації оперованих хворих і попереджає розвиток хвороб оперованого шлунка, доведено, що доцільно раннє застосування фізіотерапевтичних методів після оперативного втручання на шлунку (через 8-14 днів). Зазвичай таким хворим процедури фізіотерапії проводять
  6. Хромосомні перебудови, типи хромосомних перебудов - генетика
    Відповідно до класифікації мутацій в залежності від характеру зміни генетичного матеріалу поряд з генними мутаціями прийнято розглядати хромосомні мутації. Їх називають також хромосомними перебудовами або хромосомною аберацією. Вони являють собою переміщення генетичного матеріалу, що призводять
  7. Хірургічні захворювання печінки, короткі анатомо-фізіологічні дані - факультетська хірургія
    Після вивчення глави студент повинен: знати основи хірургічної гепатології; етіологію і патогенез захворювань печінки, їх клініку, діагностику та принципи лікування; вміти - проводити диференційну діагностику захворювань печінки, вибирати метод лікування і необхідний обсяг операції; володіти
  8. Хімічний зв'язок, її експериментальні характеристики і природа - біохімія людини
    Розробка сучасної моделі атома і передбачення на її основі властивостей індивідуальних атомів - дуже важливе досягнення квантової механіки. Однак в земних умовах рідко зустрічаються ізольовані атоми. Навколишні нас тіла неживої і живої природи побудовані з молекул. молекули - найменші частинки
© 2014-2021  ibib.ltd.ua